不久前，中国科学院上海免疫与感染研究所钟劲研究组在《Emerging Microbes & Infections》上发表了一篇关于拉沙病毒（Lassa virus, LASV）的重要研究论文。该团队成功建立了一种新型的生物安全二级（BSL-2）拉沙病毒反向遗传学操作系统，为拉沙病毒的完整生命周期研究及抗病毒药物的筛选提供了重要工具。

拉沙病毒是一种高致病性病原体，能够引发严重的拉沙出血热，导致多系统损伤。由于其致病性和相对较高的死亡率，美国疾控中心将其归类为A类生物恐怖病原。传统上，研究此类病毒需要在生物安全四级（BSL-4）条件下进行。然而，BSL-4实验室稀缺且成本高昂，这在一定程度上限制了对拉沙病毒的研究以及抗病毒药物的开发。

为了解决这一限制，钟劲研究团队开发了一种新的Lassa病毒反向遗传学系统。该系统通过在辅助细胞系中表达病毒蛋白并转染病毒最小基因组RNA，成功模拟了LASV的完整生命周期。这项创新为研究人员在生物安全二级实验室内探讨拉沙病毒的生物学特性提供了机会。

研究团队首先在Huh7细胞系中稳定表达LASV的NP、GP、Z和L蛋白，构建辅助细胞系。随后，他们通过转染体外转录的LASV最小基因组RNA（minigenome），成功产生了缺陷型病毒颗粒LASVmg。这些颗粒仅保留病毒复制、转录和组装所需的非编码序列，因此在自然条件下不具备感染性。

研究人员使用超速密度梯度离心法纯化LASVmg，并对其物理特性进行了分析，评估了LASVmg在细胞中的复制和传播能力。通过一系列实验步骤，包括离心去除细胞碎片、制备密度梯度液及收集馏分，他们成功地确定了不同馏分的感染滴度，回收了感染滴度最高的第5馏分，为后续研究提供了重要基础。

此外，研究团队还运用CRISPRi技术敲低了细胞中的α-DG和LAMP1，揭示了LAMP1在LASVmg感染中的关键作用。该蛋白是拉沙病毒进入细胞所必需的受体，而α-DG对于病毒的侵入并非必须。这一发现对理解病毒感染机制具有重要意义。同时，研究还确认了干扰素-α和利巴韦林在对抗LASV方面的作用，并揭示了利巴韦林的抗病毒机制。

总体而言，钟劲研究团队设计的新型反向遗传学系统为科研人员在BSL-2实验室开展拉沙病毒生命周期研究及抗病毒药物筛选提供了重要工具。这一研究成果将进一步推动拉沙病毒的研究，帮助应对这一公共卫生挑战。南宫28NG相信品牌力量，通过科技创新，为未来生命科学的研究和药物开发奠定基础。